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Identificación molecular de bacterias causales de sepsis neonatal mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Autores: Héctor Flores-Herrera, Rolando Maida-Claros, Haydeé Solís-Herrera. Eucario Illescas-Medrano, Francisco Javier Zavala-Díaz de la Serna.
Resumen
La sepsis neonatal es un problema mundial de salud pública que afecta a los recién nacidos. Ocurre en ocho de cada 1,000 nacimientos; sin embargo, el riesgo de morbilidad y mortalidad neonatal es el 50 % de los casos. La sepsis neonatal se expresa por signos y síntomas de un proceso infeccioso y se confirma por un hemocultivo que revela diversas bacterias patógenas. En la población de recién nacidos hay dos tipos clínicos de sepsis neonatal: Una con signos y síntomas de infección pero con hemocultivo negativo. Otro en el que no hay síntomas de sepsis pero cuyas manifestaciones se desarrollan días después. Para ambos tipos hay dificultad para dar un tratamiento apropiado en las unidades de cuidados intensivos del recién nacido. El 15 % de los nacimientos a nivel mundial con sospecha clínica y subclínica de sepsis, han recibido diferentes esquemas antimicrobianos sin que se haya identificado al agente causal de la infección. Recientemente se han utilizado metodologías moleculares como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR polimerase chain reaction) que ha permitido identificar las bacterias responsables de la sepsis neonatal, cuando el hemocultivo fue negativo. El objetivo de esta revisión, es exponer el fundamente básico de la PCR en combinación con la electroforesis en gradientes desnaturalizantes para DNA (DGGE denaturing gradient gel eletrophoresis) lo que permite identificar comunidades bacterianas complejas en un sólo paso. Asimismo, se mostrará el valor de estos recursos como herramienta de diagnóstico clínico en casos con sospecha de sepsis neonatal.
La sepsis neonatal es un problema mundial de salud pública que afecta a los recién nacidos. Ocurre en ocho de cada 1,000 nacimientos; sin embargo, el riesgo de morbilidad y mortalidad neonatal es el 50 % de los casos. La sepsis neonatal se expresa por signos y síntomas de un proceso infeccioso y se confirma por un hemocultivo que revela diversas bacterias patógenas. En la población de recién nacidos hay dos tipos clínicos de sepsis neonatal: Una con signos y síntomas de infección pero con hemocultivo negativo. Otro en el que no hay síntomas de sepsis pero cuyas manifestaciones se desarrollan días después. Para ambos tipos hay dificultad para dar un tratamiento apropiado en las unidades de cuidados intensivos del recién nacido. El 15 % de los nacimientos a nivel mundial con sospecha clínica y subclínica de sepsis, han recibido diferentes esquemas antimicrobianos sin que se haya identificado al agente causal de la infección. Recientemente se han utilizado metodologías moleculares como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR polimerase chain reaction) que ha permitido identificar las bacterias responsables de la sepsis neonatal, cuando el hemocultivo fue negativo. El objetivo de esta revisión, es exponer el fundamente básico de la PCR en combinación con la electroforesis en gradientes desnaturalizantes para DNA (DGGE denaturing gradient gel eletrophoresis) lo que permite identificar comunidades bacterianas complejas en un sólo paso. Asimismo, se mostrará el valor de estos recursos como herramienta de diagnóstico clínico en casos con sospecha de sepsis neonatal.
Abstract (English)
Neonatal sepsis is a worldwide public health problem in many newborns. Its incidence is estimated at 8 of 1000 alive births; however the risk of morbility and mortality reaches 50 %. Neonatal sepsis presents with signs and symptoms of infections; its diagnosis is confirmed by blood culture. It may be present in one of two forms: In one group there are no signs or symptoms initially; they appear several days later which hinders and/or delays medical treatment. In another group there are signs and symptoms, while blood cultures are negative. It is estimated that 15% of all newborns with neonatal sepsis are treated with a variety of broad-spectrum antibiotics even without identification of a causal agent. Recently, molecular techniques such as the polymerase chain reaction (PCR) and the sequencing by identification of bacteriae associated with the neonatal sepsis. The main goal of this review is to present the basis of the PCR in combination with the denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) and the sequencing in cases suspected of the sepsis neonatal.
Neonatal sepsis is a worldwide public health problem in many newborns. Its incidence is estimated at 8 of 1000 alive births; however the risk of morbility and mortality reaches 50 %. Neonatal sepsis presents with signs and symptoms of infections; its diagnosis is confirmed by blood culture. It may be present in one of two forms: In one group there are no signs or symptoms initially; they appear several days later which hinders and/or delays medical treatment. In another group there are signs and symptoms, while blood cultures are negative. It is estimated that 15% of all newborns with neonatal sepsis are treated with a variety of broad-spectrum antibiotics even without identification of a causal agent. Recently, molecular techniques such as the polymerase chain reaction (PCR) and the sequencing by identification of bacteriae associated with the neonatal sepsis. The main goal of this review is to present the basis of the PCR in combination with the denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) and the sequencing in cases suspected of the sepsis neonatal.
Año: 2009 | Volumen: 30 | Número: 3 | Páginas: 148-155
Descriptores: Sepsis neonatal; hemocultivo;reacción en cadena de la polimerasa; unidad ribosomal;electroforesis en gradientes dedesnaturalización.
Keywords: Neonatal sepsis; blood culture; polymerase chain reaction; subunit ribosomal; denaturing gradient gel electroforesis.
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